新型生化傳感器??蛋(dàn)白傳感器 (2005-08-26)
發布時間:2007-12-04
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由Duke大學醫學研究(jiū)中心的生化學家Homme Hellinga率領的研究(jiū)小組最近成功開(kāi)發了一項新技術(shù),利用該技術可(kě)以(yǐ)將蛋(dàn)白質修飾為對某些化學物質具有高特異性、高(gāo)敏感性的生化傳感器。這些修飾蛋白一旦(dàn)與電極相連就會產生對某混合物(wù)中特定的(de)化學物質產生反映該物質(zhì)濃度和特性的電信號。據此可以探測某些化學成分並精確計算該物質的濃度(dù)水平。
其實(shí),以前已經有利用修飾加工蛋白質成功(gōng)探測血糖及啤酒中(zhōng)麥芽糖的相關(guān)報道,這充分說明此類蛋白質(zhì)能夠將某些特定生物分子(zǐ)從某(mǒu)混合物中挑選出來,並且並(bìng)不對該混合物中的其他(tā)成分造成任何不良影響。
Hellinga認為由於(yú)這些(xiē)修飾(shì)蛋白作(zuò)用非常強大(dà)並具有高特異性的(de)特點,相信這些特異蛋白的(de)問世將為開發大量的化學探測器提供重要物質基礎。僅就(jiù)醫學用途(tú)而言,可(kě)以預測利用某一集大量此類生化傳感器的微小生化芯片,在病人床邊借助一滴(dī)血(xuè)液臨(lín)床醫生就完全能夠直接(jiē)迅速地測出患者體內某藥的血藥濃度(dù)或其他如血糖之類的代謝產物的水(shuǐ)平。還比如,麻醉醫生利用此類生(shēng)物傳感器就可以隨時(shí)監測(cè)術中病人體內麻藥(yào)的濃度(dù)變化,以及諸如腎上腺素之類的重要代謝物質的水平而(ér)不必再依靠準(zhǔn)確度較差的(de)檢(jiǎn)測指標(biāo)。因此,這些生物傳感器(qì)的開發成功,在很多(duō)情況下將會使許(xǔ)多昂貴的(de)實驗室檢查以及費時的所謂臨床分析(xī)技術(shù)被這些生化傳感器所代替而逐(zhú)漸成為曆史。而且,Hellinga先生還進一步指(zhǐ)出,借助於可植入式血糖傳感器就可以持續檢測糖尿病患者的血糖水(shuǐ)平並可(kě)為人工胰提供長期功能監測(cè)。此外,Hellinga博士還(hái)預言此類生化傳感器將來(lái)還(hái)會在監測汙染源以及生化武器等有害物質方麵大有用途。
Hellinga先生強調,該檢測係統具有很(hěn)強(qiáng)的適應性。他說:“這些(xiē)修飾(shì)蛋白是以細菌賴以檢測周圍化學環(huán)境的特異蛋白質為基礎開發出來的,由於自然界化學物質不計其數,這就決定了(le)細菌蛋白檢測係統種類的(de)多樣性,而另一方麵也就為成千(qiān)上萬生(shēng)物傳感器的誕生提供了物質基礎。借助於(yú)我(wǒ)們自行研製的功能強大的計算機輔助設計工具,將這些(xiē)種類眾多的研究對象加(jiā)以修(xiū)飾加工,使之(zhī)成為高特異性及高敏感性的蛋白生化傳(chuán)感器完全(quán)可能。”
“而且,其他生物傳感器與之相(xiàng)比,就顯得不僅操作複雜而且(qiě)效用低下,那些檢測(cè)係統(tǒng)一般都是依靠酶促反應來完成的,需要監(jiān)測化學反應的反(fǎn)應物及生(shēng)成物,並需隨時補充消耗的化學物質;加之那些生化傳感器在很大程度上都依賴於天然蛋白質,這就大大限製了(le)其適應性。我們開發的修飾蛋白傳感器不僅具有(yǒu)很好的適應性,而且這些修(xiū)飾蛋白可(kě)以認(rèn)為都是生物成分與電子成分(fèn)的穩固組合。”Hellinga補充道。
在發表的論文中,Hellinga及其合作者描述了他們如何以一種稱之為“細菌胞質結合蛋白”的細菌蛋白質為研究對象開始(shǐ)進行(háng)研究的詳細過程。那些細菌蛋白(bái)質族是由許(xǔ)多(duō)位於細菌表麵(miàn)的“超(chāo)家族(zú)”蛋白質(zhì)組成的。這些超家族蛋白就是細菌用來(lái)尋(xún)找諸如葡萄糖等食物資源以及躲避有毒物質的高效特異傳感器。
除了(le)他們廣泛(fàn)的可變性以外,這(zhè)些蛋白質主要的特點為(wéi)它(tā)們的功能(néng)活(huó)性區域是與細菌傳遞代謝信號的特(tè)定結構(gòu)域變構耦合在一起的。這樣(yàng)內部信號變化就可(kě)以直接觸發(fā)諸如細菌向食物源移動(dòng)的生物活動。所謂變構耦合現象就是指蛋白質的兩個彼此獨立的不(bú)同結構域,其中一(yī)個可以在不影(yǐng)響另一個結構域的情(qíng)況下自身發生劇烈變(biàn)化。尤(yóu)其(qí)是細(xì)菌蛋白質(zhì)的功(gōng)能活動就如(rú)鉸鏈一般,當化學靶物(wù)質(zhì)一旦與其活性部位(wèi)結合,該鉸鏈就會並攏,從而觸發產生遠處(chù)的代謝信(xìn)號(hào)。“稱(chēng)之為鉸鏈折疊運動很容易令(lìng)人理解,也較(jiào)好操作”Hellinga解釋說(shuō)。例如(rú),在一項實驗中,科研人員改變了細菌麥芽(yá)糖結合蛋白的活性部位,使之與釕金屬離子(zǐ)結合部位耦合在一起(qǐ),當該離子結構域一旦發生改變就會產生電壓變(biàn)化。因此,在加入麥芽糖使該(gāi)蛋白的結(jié)構發生變構的同時,就會產生麥芽糖濃度依賴性電流變化(huà)。
為了更好地解釋他們“鉸鏈折疊”機製的通用性,科研人員又應用與葡萄糖及穀酰胺產生特異反應的其他蛋白(bái)質研製出了另外的(de)生物電(diàn)傳感(gǎn)器。此外,為充(chōng)分說明他們開發的這一(yī)檢測(cè)係統的適應性,他們從根本上又重新設計了麥(mài)芽糖結合活性部位以便使其與鋅探測器結合。
最後為了證實他們開發的生物傳感器探測特定物質的獨立性,他們演示了(le)利用其生物電傳(chuán)感器特異性測定啤酒中麥(mài)芽糖濃度及人血漿中血糖濃度的試驗(yàn)過程。
Hellinga先(xiān)生對該係統的應用前景充滿了(le)信心,他堅信已開展的真實的具體實踐,已經(jīng)充分證實了該係統無與倫比的高效性及特異(yì)性(xìng)。